Материалы и методика исследования

Влияние производных пиримидиновых оснований на устойчивость эритроцитов к дезинтегрирующему фактору изучали методом кислотных эритрограмм.

Исследовали свойства соединений, имеющие следующее химическое строение:

						цианоцитозин

Наблюдения проводили in vivo. Было поставлено две серии экспериментов, в которых использовали 36 нелинейных крыс весом 200-250г. В каждой серии были сформированы две опытные и одна контрольная группа.

В первой серии опытов крысам одной опытной группы пятикратно внутрибрюшинно с интервалом в 48 часов вводили по 1 мл раствора цитозина в разовой дозе 1 мг/100 г массы животного, другой группы раствор цианоцитозина в той же дозе таким образом, что суммарная доза вводимого вещества в обеих группах составила 5 мг на 100 г массы животного. Во второй серии опытов в аналогичных условиях особями одной опытной группы инъецировали цитозинтетразол, другой – тиминтетразол.Крысам обеих контрольных групп вводили физиологический раствор в равном объеме.

Кровь для анализа брали в утренние часы перед кормлением животных из кончика хвоста до начала введения растворов исследуемых веществ – исходные значения, через 2,5 и 24 часа после каждого введения, а затем на 3, 5, 7 и 14 сутки после окончания инъекций. Для проведения исследования 20 мкл крови смешивали с 20 мл физиологического раствора, получая таким образом взвесь эритроцитов в разведении 1:1000.

Все исследования проводились при комнатной температуре.

Измерения оптической плотности взвеси эритроцитов производили на фотоэлектроколориметре КФК-2 УХЛ 42 при красном светофильтре. В кювету рабочей ширины 10 мм вливали 2 мл взвеси эритроцитов из отдельной пробы и добавляли к ней в качестве гемолитика 2 мл 0,004 н HCl. После этого кювету помещали в кюветодержатель прибора. С момента введения во взвесь эритроцитов гемолитика величина светопропускания исследуемого раствора начинала изменятся в связи с разрушением клеток крови. Каждые 30 секунд отмечали показания прибора по шкале экстинкции (Ео). Измерение вели до получения двух совпадающих показаний, т.е. до завершения гемолиза (Еn). В результате получали ряд убывающих экстинкций, каждая из которых соответствовала степени гемолиза к моменту отсчета. По значениям оптической плотности вычисляли процент разрушенных эритроцитов за каждые 30 секунд, принимая разность Ео-Еn за 100%.

Уровень значимости различий определяли по таблице стандартных значений критерия Стьюдента.

Результаты исследования