Док-ва непр-сти хр-м в течние клеточного цикла
В интерфазном ядре не видно хр-м, подобных митотическим (они там есть).
1.
Наблюдения Бовери(1907) за морф. постоянством хр-м при делении бластомеров аскариды→хар-р распол-я хр-м в телоФ опр-т форму интерфазного ядра и порядок распол-я хр-м в след. профазе (это посл.основой для теории↑).
2.
(косв)Пост-во ч-ла и морфологии хр-м для данного кариотипа нельзя объяснить при «разборке» хр-м.
3.
Закономерно повт-ся расположение хр-м в метафазных пластинках
4.
Правило Тейлора(1964)→воспроизв-е хр-м сходно с полуконсервативной редупликацией ДНК (метка Н3Т сохр-ся в одной хр-ме пс. деления).
5.
Индивид. хр-мы иногда можно наблюдать в интерФ-х ядрах(тельце Барра).
6.
В ряде объектов возм. выявление теломерных уч-ков хр-м в интерФ-х ядрах(хромоцентры итерФ-х ядер клеток меристемы корешков лука-теломерные уч-ки хр-м--радиоавтограф)
7.
Центромерные уч-ки хр-м в интерФ-х ядрах выявл-ся диффер. окраской на гетерохроматин(культура фибробластов мыши).
8.
Зоны локализации отд. хр-м можно выявить и в интерФ-х ядрах, не имеющих хромоцентров или конденсрованных уч-ков хр-м.(импульсная Н3Т метка в среде пс. делений располагается не диффузно, а над опр уч-ками)
9.
Изучение репаративного синтеза ДНК при УФ-облучении клеток→не
>
½ хр-м клетки облуч-ся перед делением, облученная клетка поглощает Н3Т до синт. периода , т.к. репартивный синтез, причем ввключ-я неравномерно, в соотв с пораж. хр-мами.
10. Прямые биохим данные: при опр-и мах М ДНК дрозофиллы→1хр-ма–1ДНК, длина-
const
в митозе и интерФ
Клеточный цикл, его стадии и способы изучения
-время сущ-я кл.как таковойот деления до деления = клет.цикл (бактерия-20мин, стентор-2-3сут.)
-смысл кл-ного деления - в равномерном распр-и редуплиц. кл-ного мат-ла по 2м новым клл.
→
G
1→
S
→
G
2постсинтетич/премитотич{→
G
0 Ф пролиферативного покоя, откр.
Lagta
-
R
2}→
M
{→
G
0-
R
(
est
)1} →
G
1пресинтетич/постмитотич→
--продолжительность ФФ сильно варьирует у разл.клл, но ~
одинакова у клл. 1 органа
-разл.содерж-е Д/РНК и интенс-сть их синтеза (по ФФ):
G
1 - 2
c
(ДНК),
S
↑(РНК),
S
(1/4→1)
max
(белок)
S - (2→4)c, S(ДНК), Smax(РНК),Smax(белок)
G2 - 4c, Smax(РНК), S(1/4→1)max(белок)
M
- (4→2)
c
, 1/4
Smax
(белок)
-
G
1
-рост кл., подготовкак синтезу ДНК(синтез белка-инициатора
S
?
), синтезы ферментов метаболизма РНК и белка, ферм.,необх для обр-я ДНК
-
S
–етсь всегда(искл.-2е деление мейоза), длительность
~
v
репл.ДНК(ч-лу репликонов),
v
(полипл.)=
v
(дипл.); синтез гистонов в цитопл., синтез рРНК(необх в
G
2)
-
G
2 –обычно короче ост.периодов, м. Выпадать; синтез кл-ных РНК и белков, синтез иРНК (для М), рРНК из
S
исп-ся для синтеза «белков деления»(напр.тубулинов для М веретена)
-
G
0 –дифф.клл, либо “в покое”(могут делиться)
-способы изуч-я:
1)метод получения гетерокарионов (с помощью инактивированных вирусов) из 2х разл клл.=> индуцированное влияние со ст-ны цитоплазм факторов
2) включение Н3-предшественников (синтезов Д/РНК)
{М-деление, ост. -интерФ}